關(guān)于BD _FACSAria流式細胞儀的那些事兒!
BD _FACSAria流式細胞儀是對細胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把的細胞亞群從中分選出來(lái)。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個(gè)細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說(shuō),它的細節 分辨率為零。
操作流程
1)打開(kāi)電源,對系統進(jìn)行預熱;
2)打開(kāi)氣體閾,調節 壓力,獲得適宜的液流速度;開(kāi)啟光源冷卻系統;
3)在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統;
4)利用校準標準樣品,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度zui強,并要求變異系數為??;
5)選定流速、測量細胞數、測量參數等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時(shí)選擇計算機屏上數據的顯示方式,從而能直觀(guān)掌握測量進(jìn)程;
6)樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統;
7)BD _FACSAria流式細胞儀因為實(shí)驗數據已存入計算機硬盤(pán)(有的機器還備有光盤(pán)系統,存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進(jìn)行數據處理;
8)將所需結果打印出來(lái)。
注意事項
1)光電倍增管要求穩定的工作條件,暴露的較強的光線(xiàn)下以后,需要較長(cháng)時(shí)間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
2)光源不得在短時(shí)間內(一般要1h左右)關(guān)上又打開(kāi);使用光源必須預熱并注意冷卻系統工作是否正常;
3)液流系統必需隨時(shí)保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過(guò)過(guò)濾、消毒;
4)注意根據測量對象的變換選用合適的濾片系統、放大器的類(lèi)型等;
5)BD _FACSAria流式細胞儀特別強調每次測量都需要對照組。